In Vivo Antidepressant-Like Effect Assessment of Two Aloysia Species in Mice and LCMS Chemical Characterization of Ethanol Extract.

Medicinal plants belonging to the Verbenaceae family demonstrated antidepressant effects in preclinical studies. Depression is one of the largest contributors to the global health burden of all countries. Plants from the Aloysia genus are traditionally used for affective disorders, and some of them have proven anxiolytic and antidepressant activity. The aim of this work was to evaluate the antidepressant effect of the ethanolic extract of Aloysia gratissima var. gratissima (Agg) and Aloysia virgata var. platyphylla (Avp) in mice. A tail suspension test (TST) and forced swimming test (FST) were conducted after three doses in a period of 24 h and after 7 days of treatment. Imipramine was used as an antidepressant drug. The main results demonstrated that Agg extract reduced the immobility time in mice treated orally for 7 consecutive days when compared to the control group (reduced by about 77%, imipramine 70%). Animals treated with three doses of Avp in a 24-h period had reduced immobility time in the FST (60%), and after 7 days of treatment the reduction was greater (Avp 50, 100, and 200 about 85%; Avp 400, 96.5%; p < 0.0001, imipramine, 77%). LCMS analysis showed the presence of verbascoside, hoffmaniaketone, and hoffmaniaketone acetate in both, A. virgata var. platyphylla and A. gratissima var gratissima. The flavonoids nepetin and 6-hydroxyluteolin were also found in Agg. Both tested extracts demonstrated promising antidepressant-like activity in mice.

Modelos murinos utilizados en la investigación de la Diabetes mellitus / Murine models used in research on Diabetes mellitus

La diabetes mellitus sobreviene cuando el páncreas produce una cantidad insuficiente de insulina o el cuerpo no utiliza de manera correcta esta hormona. Generalmente debido a su patogenia se clasifica en dos tipos: diabetes mellitus tipo 1 (insulino dependiente) y diabetes mellitus tipo 2. En los últimos años se ha convertido a nivel mundial en una de las principales causas de muerte y factor de riesgo para el desarrollo de diversas patologías. Debido a la implicancia en la salud humana y su cada vez mayor distribución a nivel mundial se ha convertido en uno de los tópicos de investigaciones de diversos grupos, quienes buscan comprender mejor su patogenia y desarrollar posibles tratamientos tanto a nivel molecular como celular. Las actuales técnicas de investigación desarrolladas abarcan modelos animales a los cuales se les induce esta patología químicamente, cepas de ratones que la desarrollan espontáneamente luego de cruces selectivos, y los creados por las más nuevas técnicas de ingeniería genética. A pesar de todo el esfuerzo no existe un único modelo que nos presente todo el abanico de posibilidades que se presentan en los seres humanos. Es por ello que se presentan diversos modelos con diferentes características, cada uno nos ayudará a comprender un poco más esta enfermedad.

Diabetes mellitus occurs when the pancreas produces an insufficient amount of insulin or the body does not use this hormone correctly. Generally, due to the pathogenesis, it is classified into two types: type 1 diabetes mellitus (insulin dependent) and type 2 diabetes mellitus. In recent years, it has become one of the main causes of death worldwide and a risk factor for the development of various pathologies. Due to the implication in human health and its increasing distribution worldwide, it has become one of the research topics of several groups, who are seeking to better understand diabetes pathogenesis and develop possible treatments both at the molecular and cellular level. The current research techniques developed include animal models in which this pathology is chemically induced, strains of mice that develop it spontaneously after selective crossing, and those created by the newest genetic engineering techniques. Despite all the effort, there is no single model that presents us with the full range of possibilities that occur in human beings. That is why various models with different characteristics are presented, each one will help us understand this disease a little more

Anxiolytic-like activity of Aloysia virgatavar. platyphylla leaves extract in mice / Actividad ansiolítica del extracto de hojas de Aloysia virgatavar. platyphylla en ratones

Background: Medicinal plants are part of traditional medicine and should be considered a therapeutic alternative for mental diseases. Several plants belonging to the Verbenaceae family have proved useful in treating general anxiety disorders, the most prevalent psychiatric disorders. Objective: This research aimed to verify the extract's safety, the effect on general behavior, and the effect on sleeping time, as well as to evaluate the anxiolytic-like effect of the methanol extract of Aloysia virgata var. platyphylla (Avp), in mice. Methodology: The toxicity test was done according to the OECD guide (mice groups n=5), and general behavior was observed during the assay. Sleeping time was assessed using the pentobarbital-induced hypnosis method (n=8). Male Swiss albino mice (n=6) were treated with 50 to 400 mg/kg of Avp extract and diazepam as a control. The anxiolytic-like effect was tested through the hole board and elevated plus-maze test. Results: The Avp extract has no side effects in tested doses, and no central nervous system depressant activity was noted. A. virgatavar. platyphyllaincreased exploration (number and time) in the hole board. In the elevated plus-maze, increased number and time into open arms were evidenced compared to the control group. Conclusion: With all these results, we concluded that the Avp extract is safe and has a potential anxiolytic-like activity in the animal model used

Antecedentes: Las plantas medicinales forman parte de la medicina tradicional y deben ser consideradas una alternativa terapéutica para las enfermedades mentales. Varias plantas pertenecientes a la familia Verbenaceae han demostrado su utilidad en el tratamiento de los trastornos de ansiedad, uno de los trastornos psiquiátricos más prevalentes. Objetivo: Esta investigación tuvo como objetivo verificar la seguridad del extracto, el efecto sobre el comportamiento general y el efecto sobre el tiempo de sueño, así como evaluar el efecto tipo ansiolítico del extracto metanólico de Aloysia virgata var. platyphylla(Avp), en ratones. Metodología: La prueba de toxicidad se realizó de acuerdo con la guía de la OCDE (grupos de ratones n=5), y se observó el comportamiento general durante el ensayo. El tiempo de sueño se evaluó mediante el método de hipnosis inducida por pentobarbital (n=8). Se trataron ratones albinos suizos macho (n=6) con 50 a 400 mg/kg de extracto de Avp y diazepam como control. El efecto ansiolítico se probó a través de la placa perforada y prueba del laberinto en cruz elevado. Resultados: El extracto de Avp no tiene efectos secundarios en las dosis probadas y no se observó actividad depresora del sistema nervioso central. A. virgata var. platyphylla aumentó la exploración (número y tiempo) en el tablero de agujeros. En el laberinto en cruz elevado, se evidenció un mayor número y tiempo en los brazos abiertos en comparación con el grupo de control. Conclusión: Con todos estos resultados, concluimos que el extracto de Avp es seguro y tiene una potencial actividad ansiolítica en el modelo animal utilizado

Effect of Prosopis ruscifolia on incretin and insulin secretion in alloxan-induced hyperglycemic rats / Efecto de Prosopis ruscifolia sobre la secreción de incretina e insulina de ratas hiperglicémicas por aloxano

Background: Diabetes mellitus treatment is based on oral hypoglycemic agents or insulin. Medicinal plants constitute an option, and the leaves of Prosopis ruscifolia (Pr) were shown to be effective in reducing glycemia in hyperglycemic animals. Objective: In this paper, we report the effect of P. rusciofolia (Pr) on insulin and incretin secretion in alloxan-induced hyperglycemic rats. Methodology: The effective dose was selected, and four groups (n=10) of Wistar rats were used. Two groups with normal glycemia received water or Pr (75 mg/Kg, per os, p.o.), and two groups with hyperglycemia induced by alloxan (intraperitoneal, ip), received water or Pr (75 mg/Kg, p.o.) for 2 weeks. Oral glucose tolerance test, and incretin and insulin levels were measured at the end of the experimental period. Results: The results showed that extract promotes better tolerance to oral glucose overload, in addition to a statistically significant (p<0.001) increase in blood levels of incretin and insulin, compared to the hyperglycemic rats. Conclusion: It is concluded that the ethanolic extract of P. ruscifolialeaves has a hypoglycemic effect in hyperglycemic animals by a mechanism that involves the incretin-insulin system

Antecedentes: la diabetes mellitus es una enfermedad metabólica cuyo tratamiento se basa en el uso de agentes hipoglicemiantes orales o insulina. Una opción al tratamiento son las plantas medicinales y en ese sentido, estudios previos en animales con hojas de Prosopis ruscifolia (Pr) han demostrado efecto hipoglicemiante. Objetivo: en este trabajo se reporta el efecto de P. rusciofolia (Pr) en la secreción de insulina e incretina, en ratas hiperglicémicas por aloxano. Metodología: se emplearon cuatro grupos de ratas Wistar (n=10). Dos grupos con glicemia normal que fueron tratadas con agua Pr (75 mg/Kg, per os, p.o.) y dos grupos con hiperglicemia inducida por la inyección intraperitoneal de aloxano recibieron agua Pr (75 mg/Kg, per os, p.o.) durante dos semanas. Se midieron la tolerancia oral a la glucosa, y los niveles de incretina e insulina al final del periodo de experimentación. Resultados: se encontró que el extracto promueve una mayor tolerancia a la sobrecarga de glucosa, y además un incremento significativo (p<0.001) de los niveles de incretina e insulina en sangre, comparados al grupo de ratas hiperglicémicas. Conclusión: se concluye que e l estracto etanólico de las hojas de P. ruscifolia tienen efecto hipoglicemiante en animales hiperglicémicos por un mecanismo que incluye al sistema incretina-insulina

Modelos in vitro utilizados para predecir hepatotoxicidad de medicamentos en la fase pre-clínica / In vitro models used to predict hepatotoxicity of medications in the pre-clinical phase

El hígado es el órgano principal del cuerpo encargado de mantener la homeostasis interna, además cumple un rol fundamental en el metabolismo de medicamentos (xenobióticos) por lo tanto es vulnerable a lesiones fisiológicas o anatómicas. La lesión hepática inducida por fármacos (DILI) es la causa más común del fracaso del desarrollo pre-clínico y clínico de nuevos medicamentos, y de las advertencias de recuadro negro y el retiro de un medicamento del mercado. Por lo tanto, representa un problema grave para las industrias farmacéuticas, así también para el paciente, profesionales de la salud y las entidades reguladoras. Cabe mencionar que existen dos tipos de lesión hepática inducida por fármacos: farmacológicas o intrínsecas y la idiosincrásica. Durante la etapa pre-clínica del proceso de desarrollo de un medicamento se realiza un panel de cribado a los medicamentos candidatos empleando modelos celulares in vitro que incluyen sistemas de cultivos en 2D, 3D y líneas celulares de hepatoma humano, aunque también existen otros enfoques en el cual utilizan al pez cebra (reemplazo a los modelos animales) o modelos celulares basados en cribado de alto contenido. Posteriormente se emplean animales que, aunque presenten diferencias específicas respecto al humano a nivel hepatocelular igualmente se utiliza, para realizar predicciones cuantitativas y cualitativas de las principales propiedades farmacodinámicas, farmacocinéticas y toxicológicas del medicamento candidato. Actualmente existe un mayor esfuerzo para ir mejorando algunos modelos in vitro ya existentes, acoplando alguna herramienta o modificándolo genéticamente hacia el producto de interés proporcionando nuevos enfoques útiles para la predicción potencial tóxico a nivel hepático de los medicamentos candidatos.(AU)

The liver is the main organ of the body whose function is to maintain internal homeostasis, it also plays a fundamental role in the metabolism of drugs (xenobiotics), therefore it is vulnerable to physiological or anatomical injuries. Drug-induced liver injury (DILI) is the most common cause of preclinical and clinical development failure of new drugs, black box warnings, and drug recall. Therefore, it represents a serious problem for the pharmaceutical industries, as well as for the patient, health professionals and regulatory entities. It should be mentioned that there are two types of drug-induced liver injury: pharmacological or intrinsic and idiosyncratic. During the pre-clinical stage of the drug development process, candidate drugs are screened using in vitro cell models that include 2D, 3D culture systems and human hepatoma cell lines, although other approaches use zebrafish (replacement for animal models), or cell models based on high content screening. Subsequently, animals are used, which despite having specific differences with respect to humans at the hepatocellular level are also used to make quantitative and qualitative predictions of the main pharmacodynamic, pharmacokinetic and toxicological properties of the candidate drug. Currently, there is a major effort to improve some existing in vitro models, coupling a tool or genetically modifying it towards the product of interest, providing new useful approaches for the potential prediction of liver toxicity, of the candidate drugs.(AU)

Efecto del consumo de alimentos con elevado contenido lipídico sobre el perfil lipídico de ratones sanos / Effect of the consumption of foods with high lipid content on lipid profile of healthy mice

La alteración de los lípidos en sangre o dislipidemias sobre todo el colesterol y triglicéridos, son un factor de riesgo de ateroesclerosis y enfermedades cardiovasculares. En este trabajo se analizó el efecto del consumo de huevo, clara, yema de huevo, mantequilla y maní sobre el perfil lipídico de ratones sanos. Se utilizaron seis grupos de ratones hembras sanas, el grupo control (GC) recibió balanceado comercial, mientras que en los demás grupos, 15% de su alimentación diaria consistió en huevo entero (GHE), yema (GY), clara de huevo (GCH), manteca o mantequilla (GMT) o maní (GMN), durante 28 días. Al final de este periodo, se obtuvo la muestra de suero para la determinación de los niveles de colesterol total (CT), triglicéridos (TG), colesterol HDL, colesterol LDL y colesterol VLDL, y se calcularon los índices de riesgo aterogénico y de riesgo cardiaco. Se observó un aumento estadísticamente significativo en los niveles de CT y LDL en relación al GC en los grupos GHE (p<0,0001), GY (p<0,0001), GCH (p<0,005) y GMT (p<0,001), mientras que en niveles de TG presentan un aumento los grupos GHE (p<0,0001) y GY (p<0,0001). El nivel de HDL aumentó significativamente en los grupos GHE (p<0,005) y GMT (p<0,001), y en cuanto al índice de riesgo cardiaco y aterogénico el grupo GY fue el único que reveló aumento significativo (p<0,0001). En el grupo que recibió maní (GMN), no se alteraron los niveles de lípidos, y por lo tanto tampoco el riesgo cardiaco ni aterogénico, lo que se traduce en un menor riesgo de enfermedades cardiovasculares de este grupo(AU)

The alteration of blood lipids or dyslipidemias, especially cholesterol and triglycerides, are a risk factor for atherosclerosis and cardiovascular diseases. In this work, the effect of consumption of egg, egg white, egg yolk, butter and peanut on the lipid profile of healthy mice was analyzed. Six groups of healthy female mice were used, the control group (GC) received commercial pellets, while for the other groups, 15% of their daily food consisted of whole egg (GHE), egg yolk (GY), egg white (GCH) ), butter (GMT) or peanut (GMN), for 28 days. At the end of this period, a serum sample was obtained for the determination of the levels of total cholesterol (CT), triglycerides (TG), HDL cholesterol, LDL cholesterol and VLDL cholesterol, and cardiac and atherogenic risk index were calculated. A statistically significant increase in TC and LDL levels was observed in relation to GC in the GHE (p <0,0001), GY (p <0,0001), GCH (p <0,005) and GMT (p <0,001) groups; whereas TG levels showed an increase in the GHE (p <0,0001) and GY (p <0,0001) groups. The HDL level increased significantly in the groups GHE (p <0,005) and GMT (p <0,001), and in terms of the cardiac and atherogenic risk index, the GY group was the only group that revealed a significant increase (p <0,0001). In the group that received peanuts (GMN), the lipid levels were not altered, and therefore neither the cardiac nor the atherogenic risk, which indicates the risk of cardiovascular diseases in this group, were affected(AU)

Efecto del consumo de pulpa de Carica papaya sobre la glicemia y peso de ratones normo e hiperglicémicos por aloxano / Effect of consumption of Carica papaya pulp on glycaemia and weight of normo and alloxan induced hyperglycemic mice

La Diabetes Mellitus se caracteriza por la menor capacidad del organismo de utilizar la glucosa, en la diabetes de tipo 2, la obesidad es el factor más relevante y más posible de prevenir. En este estudio se determinó el efecto del consumo de la pulpa de papaya o mamón (Carica papaya) sobre la glicemia y el peso corporal en ratones albinos suizos machos normo e hiperglicémicos inducidos por aloxano. Se organizaron cuatro grupos de seis ratones cada uno. Grupo I: normoglicémicos con dieta estándar, Grupo II: hiperglicémicos con dieta estándar, Grupo III: normoglicémicos con dieta estándar y papaya, Grupo IV: hiperglicémicos con dieta estándar y papaya, el experimento duró 28 días. Los valores obtenidos indican un descenso significativo en la glicemia de los animales del grupo hiperglicémico que fue alimentado con la pulpa de papaya (p<0,01), y también se observó una reducción estadísticamente significativa (p<0,001) en el peso corporal de los animales normoglicémicos que recibieron la pulpa de papaya. El consumo de C. papaya en los animales hiperglicémicos mejoró la glicemia, y produjo un impacto positivo en el metabolismo de la glucosa, y además disminuyó significativamente el peso corporal en los animales normoglicémicos(AU)

Diabetes Mellitus is characterized by the lower capacity of the body to use glucose, in type 2 diabetes, obesity is the most relevant environmental factor and most possible to prevent. In this study, the effect of the consumption of papaya pulp (Carica papaya) on glycaemia and body weight in male Swiss albino mice and hyperglycemic mice induced by alloxan was determined. Four groups of six mice each were organized. Group I: normoglycemic with standard diet, Group II: hyperglycemic with standard diet, Group III: normoglycemic with standard diet and papaya, Group IV: hyperglycemic with standard diet and papaya, the experiment lasted 28 days. The results showed a significant decrease in the glycaemia of animals in hyperglycemic group that was fed with the papaya pulp (p <0.01), and also a statistically significant reduction (p <0.001) in the body weight in normoglycemic mice fed with standard diet and papaya. The consumption of C. papaya in hyperglycemic animals improved the glycaemia, and positively impacted in glucose metabolism, additionally induced a significant reduction on the body weight of normoglycemic animals(AU)

Evaluación del efecto de Aloe barbadensis sobre el peso en ratones normopesos y obesos / Evaluation of the effect of Aloe barbadensis on weight in normal and obese mice

La obesidad es el trastorno metabólico más frecuente, para el tratamiento es fundamental el cambio del tipo alimentación y mantener un estilo de vida saludable. La publicidad engañosa sobre productos denominados milagrosos conlleva a un consumo desmedido, no controlado y sin previa evaluación de los resultados sobre el peso y/o la posible toxicidad de los mismos. Se diseñó una investigación preliminar en ratones, para verificar el efecto del zumo de Aloe barbadensis y un producto comercial sobre el peso de ratones normopesos y obesos inducidos por glutamato monosódico (GMS), después de cuatro semanas de tratamiento. El grupo de ratones inducidos a obesidad con GMS, presentaron un porcentaje de cambio de peso de 160,5±37,5%, mientras que en el grupo de ratones normopesos fue de 59,4±12,1%, esta diferencia resultó significativa (p<0,001). En los ratones obesos que recibieron el zumo de A.barbadensis se logró un descenso no significativo de peso de 2,8% con respecto al peso al inicio de la intervención (p 0,05). En los ratones obesos tratados con el producto comercial se observó un aumento de peso, aunque en menor proporción que los obesos que recibieron agua (3,5% y 4,4%, respectivamente). Los resultados indican que el zumo de Aloe barbadensis induce un descenso de peso mayor en los animales obesos, comparado con el producto comercial, sin embargo, esto no es significativo en el periodo de observación. Palabras claves: Aloe barbadensis, peso corporal, obesidad, glutamato monosódico, ratón.

Obesity is the most frequent metabolic disorder, for the treatment is fundamental to change the type of food and maintain a healthy lifestyle. Misleading advertising of so-called miraculous products leads to excessive, uncontrolled consumption and without prior evaluation of the effect on weight or their possible toxicity. A preliminary investigation was designed in mice, to verify the effect of the juice of Aloe barbadensis and a commercial product on the weight of normal and obesemice induced by monosodium glutamate(MSG),after four weeks of treatment. The group of mice induced to obesity with MSG had a weight change percentage of 160.5 ± 37.5%, while in the group with normal body weight was of 59.4 ± 12.1%, this difference was significant (p<0,001). In the obese mice that received the juice of A. barbadensis, a non-significant weight decrease of 2.8% was achieved when compared with the weight at the beginning of the intervention (p0.05). In obese mice treated with the commercial product,an increase in weight was observed, although in a smaller proportion than the obese ones that received water (3.5% and 4.4%, respectively). The results indicated that Aloe barbadensis juice induced a greater weight loss in obese animals, compared to the commercial product, however, this is not significant in the period considered. Key words: Aloe barbadensis, body weight, obesity, monosodic glutamate, mice.

Influencia del consumo de pulpa de aguacate,Persea americana, sobre el metabolismo lipídico en ratones normolipémicos e hiperlipémicos inducidos por dieta / Influence of avocado (persea americana) pulp consumption on lipid metabolism in normolipidemic and diet induced hyperlipidemic mice

La dislipidemia es un factor de riesgo para el desarrollo de enfermedades cardiovasculares, una de las principales causas de muertes a nivel mundial. En este trabajo se estudió el efecto del aguacate (Persea americana) sobre el metabolismo lipídico de ratones normo e hiperlipémicos inducidos con dieta hiperlipídica. Ratones machos, fueron distribuidos en 4 grupos DE (dieta estándar), DEa (dieta estándar y aguacate); DH (dieta hiperlipídica) y DHa (dieta hiperlipídica y aguacate) y observados por 28 días. Luego de este periodo se determinaron los niveles de Colesterol Total, Triglicéridos y col-HDL y se calcularon los valores de col-LDL, VLDL e índices de riesgo aterogénico y de riesgo coronario. El grupo DH mostró niveles de CT, TG, col-LDLy VLDL significativamente superiores (p<0,001) a los valores alcanzados en el grupo DE. En los grupos DHa y DEa se redujeron significativamente (p<0,001) las concentraciones de CT, TG, col-LDL y VLDL, en comparación al grupo DH. Los grupos DEa y DHa difieren significativamente (p<0,005) en el nivel de CT, éste último presenta valores más bajos, los otros parámetros cuantificados no mostraron diferencias significativas. No hubo diferencias significativas para los valores del col-HDL en ningún grupo de estudio. La inducción a la hiperlipemia con un modelo de dieta hiperlipídica, generó incrementos importantes en el CT, TG, col-LDL y VLDL, además de aumentar el riesgo aterogénico. El consumo de la pulpa de aguacate redujo los niveles de CT, TG, col-LDL, VLDL y el índice de riesgo aterogénico en el grupo de ratones hiperlipémicos(AU)

Influence of avocado (Persea americana) pulp consumption on lipid metabolism in normolipidemic and diet induced hyperlipidemic mice . Dyslipidemia is a risk factor for developing cardiovascular disease, a major cause of deaths worldwide. The aim of this work is to study the effect of avocado (Persea americana), on lipid metabolism on normolipidemic and hyperlipidemic mice induced with high fat diet. Four groups of animals receiving standard diet (DE), standard and avocado diet (DEa), high fat diet (DH) and high fat and avocado diet (DHA) were used. All animals were observed for a period of 28 days. Blood sample was obtained at the end of experimentation period by cardiac puncture on anesthetized animals, and the levels of Cholesterol, triglycerides and col-HDL were de- termined and c-LDL, VLDL and atherogenic and coronary risk factors were calculated. DH group showed levels of TC, TG, c-LDL and VLDL significantly higher (p<0,001) than the values achieved in DHa group. DHa and DEa plasmatic values of TC, TG, c-LDL and VLDL were significantly reduced (p <0.001) compared to DH group. DEa and DHA groups differed significantly (p <0.005) in the level of CT, the latter has lower values, the other quantified parameters showed no significant differences. There were no significant differences for c-HDL values in any group. Hyperlipidemia induction with a model of high fat diet produced significantly increasing values of TC, TG, c-LDL and VLDL, besides of increasing the atherogenic risk. The benefit of avocado pulp consists in reduction of TC, TG, c-LDL, VLDL and the index of atherogenic risk(AU)